Ход исследования
Центрифугируют свежую утреннюю мочу. К осадку прибавляют 1–2 капли реактива, размешивают, каплю берут на стекло, покрывают покровным стеклом и микроскопируют. При этом различают 2 вида лейкоцитов: одни имеют ядра пурпурно-красного цвета и бесцветную или бледно-розовую цитоплазму, другие бледно-синее, иногда бледно-фиолетовое ядро и почти бесцветную цитоплазму. Бледно-синие клетки называются клетками Штернгеймера – Мальбина, в цитоплазме некоторых из них заметно активное движение гранул.
II способ
Реактив – 250 мг эозина, 10 мл глицерина, 2 мл 1%-ного фенола, 0,5 мл 40 %-ного формалина, 87,5 мл дистиллированной воды.
Ход исследования
Такой же, как предыдущий. Клетки Штернгеймера – Мальбина не окрашиваются или имеют бледно-голубой цвет. Ядра всех остальных лейкоцитов окрашиваются в розовый цвет.
III способ
Реактив – 30 мл насыщенного раствора метиленового синего в абсолютном алкоголе, 1,6 мл 1%-ного раствора КОН, 110 мл бидистиллированной воды.
Ход исследования
Каплю реактива наносят на предметное стекло рядом с каплей мочевого осадка. Смешивают и микроскопируют в первые 5–10 мин.
Клетки Штернгеймера – Мальбина бесцветные, ядра остальных лейкоцитов – синего цвета.
В норме в мочевом осадке у мужчин от 0 до 3 лейкоцитов в поле зрения, у женщин – от 0 до 5 лейкоцитов в поле зрения.
Увеличение числа лейкоцитов в мочевом осадке свидетельствует о воспалительных процессах в почках или мочевыводящих путях.
Наличие в моче «активных» лейкоцитов свидетельствует об интенсивности воспалительного процесса независимо от его локализации.
Эпителиальные клетки
Эпителиальные клетки в мочевом осадке имеют различное происхождение, т. е. десквамация их происходит с органов, покрытых различными видами эпителия (многослойного плоского, переходного и кубического призматического).
Клетки плоского эпителия полигональной или округлой формы, больших размеров, бесцветные, с небольшим ядром, располагаются в виде отдельных экземпляров или пластами.
Клетки переходного эпителия различной формы (полигональные, «хвостатые», цилиндрические, округлые) и величины, имеют желтоватую окраску, интенсивность которой зависит от концентрации мочи и наличия пигментов, содержат довольно крупное ядро.
Среди клеток можно встретить двуядерные. Иногда в клетках наблюдают дегенеративные изменения в виде грубой зернистости и вакуолизации цитоплазмы.
Клетки почечного эпителия неправильной круглой формы, угловатые или четырехугольные, небольших размеров (в 1,5–2 раза больше лейкоцита), слегка желтоватого цвета. В цитоплазме клеток обычно выражены дегенеративные изменения: зернистость, вакуолизация, жировая инфильтрация.
В результате этих изменений ядра часто не выявляются. Клетки почечного эпителия относятся к кубическому и призматическому эпителию, выстилающему почечные канальцы. Чаще они располагаются в виде групп, цепочек. В некоторых случаях встречаются в виде комплексов округлой или фестончатой формы, состоящих из большого количества клеток разной величины с явлениями жирового перерождения.
В мочевом осадке практически всегда встречают клетки плоского и переходного эпителия от единичных в препарате до единичных в поле зрения.
Единичные в препарате клетки почечного эпителия на фоне нормальной микроскопической картины мочевого осадка не дают основания говорить о патологии.
Особого диагностического значения клетки плоского эпителия, попадающие в мочу из влагалища, наружных половых органов и мочеиспускательного канала, не имеют, но если их обнаруживают расположенными пластами в моче, взятой катетером, то это может указывать на метаплазию слизистой оболочки мочевого пузыря. Такую картину можно наблюдать при лейкоплакии мочевого пузыря и мочеточников, что является предопухолевым состоянием.
Переходный эпителий выстилает слизистую оболочку мочевого пузыря, мочеточников, почечных лоханок, крупных протоков предстательной железы и простатического отдела мочеиспускательного канала.
Усиленная эксфолиация клеток этого эпителия может быть при острых воспалительных процессах мочевого пузыря и лоханок, интоксикациях, а также при мочекаменной болезни и новообразованиях мочевыводящих путей.
Клетки почечного эпителия можно выявить в мочевом осадке при поражении паренхимы почек (нефритах), интоксикациях, расстройствах кровообращения. Обнаружение клеток почечного эпителия в тесной связи с цилиндрами говорит о тяжелом поражении почек.
Цилиндры – элементы осадка – представляют собой белковые или клеточные образования канальцевого происхождения, имеющие цилиндрическую форму и различную величину. В мочевом осадке различают следующие виды цилиндров: гиалиновые, зернистые, восковидные, эпителиальные, эритроцитарные, пигментные, лейкоцитарные.
Гиалиновые цилиндры имеют нежные контуры, прозрачны, при ярком освещении плохо заметны. На поверхности может быть легкая зернистость за счет аморфных солей или клеточного детрита. Образуются из свернувшегося белка.
Появление гиалиновых цилиндров свидетельствует о развитии протеинурии, что является следствием повышенной проницаемости клубочковых капилляров. Они представляют собой коллоидную форму белка, возникающую при изменении рН. Постоянно гиалиновые цилиндры присутствуют при органических поражениях почек, лихорадочных состояниях.
Зернистые цилиндры имеют более резкие контуры и состоят из плотной зернистой массы желтоватого цвета. Они образуются при наличии в эпителильных клетках выраженной дегенерации.
Восковидные цилиндры имеют резко очерченные контуры и гомогенную с блеском, слегка желтоватую структуру. Образуются из уплотненных гиалиновых и зернистых цилиндров при задержке их в канальцах. Они обнаруживаются при тяжелых поражениях паренхимы почек.
Эпителиальные цилиндры имеют четкие контуры и состоят из слущенных и склееннных друг с другом эпителиальных клеток канальцев. Они появляются при нефрозах, нефросклерозах и других патологических процессах в почках.
Эритроцитарные цилиндры желтоватого цвета, состоят из массы эритроцитов, образуются при почечной гематурии. Они обнаруживаются почти у половины больных с острым гломерулонефритом, а также при почечных паренхиматозных кровотечениях.
Пигментные цилиндры могут быть обнаружены при гемоглобинурии и миоглобинурии; они коричневого цвета, имеют сходство с зернистыми.
Лейкоцитарные цилиндры образуются из массы лейкоцитов, обнаруживаются при гнойных процессах в почках, пиелонефритах.
Кроме цилиндров, образованных из белка и клеток, в мочевом осадке иногда встречаются образования цилиндрической формы из аморфных солей, не имеющие практического значения. Эти образования растворяются при подогревании препарата или прибавлении к нему капли щелочи или кислоты.
В нормальной моче можно встретить единичные гиалиновые цилиндры (1–2 в препарате).
Цилиндрурия является симптомом поражения паренхимы почки; хотя и считается, что вид цилиндров особого диагностического значения не имеет, гиалиновые цилиндры подтверждают ренальную протеинурию, а лейкоцитарные и эритроцитарные дают возможность предположить источник лейкоцитурии и гематурии.
Принцип метода
Подсчет числа форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров) в суточном объеме мочи с помощью счетной камеры.
Специальное оборудование
Микроскоп, счетная камера.
Классический вариант исследования требует строгого соблюдения правил хранения мочи на протяжении длительного периода. Мочу собирают в течение суток: утром больной освобождает мочевой пузырь, а затем в течение 24 ч собирает мочу в сосуд с несколькими каплями (4–5) формалина или 2–3 кристаллами тимола; желательно хранить мочу в холодильнике.
Во избежание получения заниженных данных, обусловленных распадом форменных элементов в нейтральной (щелочной) моче или при низкой ее плотности, надо назначать больному в течение суток, предшествовавших исследованию, мясную пищу с ограничением жидкости, чтобы получить мочу кислой реакции и более высокой концентрации. Если нет возможности собрать мочу с учетом описанных условий, то можно собирать ее в течение 10–12 ч. В этом случае точность результата страдает, но собрать мочу легче. Собирают мочу за ночное время следующим образом: в 10 ч вечера больной освобождает мочевой пузырь, мочу выливают, и до 8 ч утра мочеиспускания не должно быть (интервал времени – 10 ч); всю мочу, полученную в 8 ч утра, посылают в лабораторию для исследования. При никтурии такой вариант сбора мочи не подходит.
Ход исследования
Собранную мочу тщательно перемешивают и измеряют ее объем. Для исследования получают осадок из количества мочи, выделенной за 12 мин (1/5 ч), которое рассчитывают по формуле:
Q = V / 5t,
где Q – объем мочи, выделенной за 12 мин, мл;
V – объем мочи, собранной за время исследования, мл;
t – время сбора мочи, ч;
5 – коэффициент пересчета за 1/5 ч.
Рассчитанное количество мочи центрифугируют в мерной центрифужной пробирке при скорости 3500 об./мин в течение 3 мин или при скорости 2000 об./мин в течение 5 мин, отделяют верхний слой, оставляя 0,5 мл мочи с осадком. Если осадок превышает 0,5 мл, то оставляют 1 мл мочи. Осадок тщательно перемешивают и заполняют счетную камеру. Подсчитывают раздельно количество лейкоцитов, эритроцитов, цилиндров (эпителиальные клетки не считают) и рассчитывают содержание форменных элементов в 1 мкл осадка мочи.
Расчет
Если подсчет проводят в камере Горяева, объем которой равен 0,9 мкл, то количество форменных элементов в 1 мкл определяют по формуле: