Трихомонады – подвижные организмы, быстро перемещаются при помощи жгутиков и ундулирующей мембраны. Стадия цисты отсутствует.
Трихомонады хорошо растут на питательных средах в присутствии бактерий, которыми питаются.
Клиническая картина
T. hominis обитает в толстой кишке человека, где иногда интенсивно размножается. Полагают, что при массивном заражении этим паразитом у ослабленных больных и детей ухудшается течение предшествующих заболеваний толстой кишки.
Балантидии
Тип Ciliophora, класс Kinttofragminophores, подкласс Vestibuliteria, отряд Trichostomatida, род Balantidium.
Паразиты толстой кишки человека – Balantidium coli (Malmsten) относятся к инфузориям, вызывают изъязвление и перфорацию стенок кишечника, что может явиться причиной перитонита.
Микробиология
Клетки балантидий представляют собой крупную инфузорию яйцевидной формы, достигающую 200 мкм. Они густо покрыты короткими ресничками, расположенными продольными рядами. Благодаря ресничкам осуществляются передвижение и заталкивание питательных веществ вместе с током жидкости в цитостом. На переднем конце клетки имеется щелевидное углубление (перистом), на дне которого помещается ротовое отверстие (цитостом). Ядерный аппарат, типичный для инфузорий, состоит из бобовидного макронуклеуса, расположенного примерно в центре клетки, и находящегося по соседству с ним микронуклеуса. В цитоплазме имеются пищеварительные и сократительные вакуоли, на заднем конце тела – анальная пора.
Циста правильной шарообразной формы (50–60 мкм) с отчетливо выраженной бесцветной двухконтурной оболочкой и хорошо заметным макронуклеусом.
Жизненный цикл
В. coli состоит из двух фаз: бесполой и половой (конъюгация). После конъюгации паразит инцистируется. Цисты выводятся наружу с фекальными массами и довольно стойко сохраняются во внешней среде. Они имеют круглую или овальную форму, покрыты двухслойной оболочкой. Заражение человека цистами происходит через рот.
В. Сoli растет на тех же питательных средах, что и дизентерийная амеба.
Клиническая картина
Балантидий может жить в просвете толстой кишки человека, питаясь кишечным содержимым и не оказывая патогенного действия на организм своего хозяина. При внедрении в слизистую оболочку кишечника и проникновении в толщу его стенки паразит начинает питаться клетками хозяина, заглатывая в большом количестве эритроциты. Это приводит к изъязвлению внутренней стенки кишки, что сопровождается тяжелой формой кровавого поноса.
Исследование кала на гельминты
Инвазии людей паразитическими червями распространены довольно широко.
Важнейшим звеном всей работы служит гельминтологическая диагностика. Для постановки диагноза гельминтозов исследуют испражнения, дуоденальное содержимое, мокроту, мочу, содержимое кист, кровь, перианальную и ректальную слизь, содержимое подногтевых пространств.
В клинической лаборатории чаще всего подвергают исследованию кал. Для анализа достаточно иметь небольшое количество материала. В кале можно обнаружить сами гельминты, их фрагменты или яйца.
В кале встречаются яйца следующих гельминтов:
– из нематод (круглых червей) – аскарид, власоглава, томикса, кривоголовки двенадцатиперстной, некатора, трихостронгилиды;
– из трематод – двуустки печеночной, двуустки кошачьей, двуустки ланцетовидной, шистосомы;
– из ленточных червей – цепня невооруженного, цепня вооруженного, лентеца широкого, лентеца малого.
В лабораторию должны доставляться свежие (менее суточной давности) испражнения (разовая порция) в чистой стеклянной посуде. Для контроля лечения направляют все порции фекалий, выделенные в дни приема антигельминтного средства.
Кал прежде всего должен быть подвергнут макроскопическому осмотру. При этом могут быть выявлены целые экземпляры паразитов и их фрагменты (части, стробилы, членики).
Для яиц гельминтов характерна четкая морфологическая структура. Все они имеют оболочку определенного строения, что отличает их от других образований, попадающих в кал.
Яйца каждого вида гельминтов имеют свои постоянные размеры и могут содержать яйцеклетку, развитые личинки или желточные клетки.
Макроскопическое исследование служит для обнаружения в кале целых гельминтов и их фрагментов невооруженным глазом или с помощью ручной лупы.
Приготовление препарата
Для исследования испражнения смешивают с водой до жидкой консистенции и переносят небольшими порциями в чашку Петри, тщательно осматривая на черном фоне. Пинцетом или препаровальными иглами извлекают все похожие на фрагменты гельминтов белые частицы.
Крупные образования помещают между двумя предметными стеклами и рассматривают под лупой. Более удобен для этой цели способ отстаивания (отмучивания). Собранные фекалии помещают в высокие стеклянные цилиндры, банки (можно в ведро), смешивают с 5–10-кратным количеством воды и дают отстояться. Мутный слой над осадком сливают, снова заливают водой, перемешивают, отстаивают и воду снова сливают. Эту процедуру повторяют, пока вода над осадком не станет прозрачной, затем воду сливают и просматривают осадок в черной или прозрачной кювете на черном фоне.
Дифференцировать отдельные виды гельминтов можно с учетом их анатомоморфологических признаков. Так, определить вид нематод можно только по целым экземплярам, реже по крупным фрагментам.
Распознавание нематод не представляет затруднений; их рассматривают невооруженным глазом или под лупой.
Цестоды можно диагностировать по зрелым членикам, сколексам. Определение вида ленточных червей по членику производят следующим образом. Обнаруженный в испражнениях членик отмывают в воде, помещают на предметное стекло, покрывают другим предметным стеклом и при легком надавливании на край препарата рассматривают на свет. Отмечают форму членика (узкий, длинный характерен для тениид, плоский, короткий – для лентеца широкого), строение матки.
Распознавание крупных цестод по их сколексам производят после дегельминтизации. Отмытого паразита осматривают, отыскивают его тонкий конец. Обнаружив головку, рассматривают ее строение с помощью лупы или под малым увеличением микроскопа. Определение трематод осуществляют только после дегельминтизации на основании особенностей формы, размера, внутреннего строения (расположения семенников и т. д.).
Изучению подвергают нативные препараты и препараты после специальной обработки.
Самый простой и удобный метод исследования испражнений – метод мазка. Нативный мазок готовят с 50 %-ным раствором глицерина. Для этого деревянной палочкой из разных мест доставленного кала берут частицу величиной со спичечную головку и готовят несколько препаратов.
Кал тщательно растирают на предметном стекле с несколькими каплями 50 %-ного раствора глицерина до получения достаточно равномерного и прозрачного мазка, который занимает почти всю поверхность стекла. Микроскопируют мазок, не применяя покровных стекол. Раствор глицерина хорошо осветляет препарат и предохраняет его от высыхания. При отсутствии глицерина препарат можно готовить с изотоническим раствором хлорида натрия или водой. Вероятность обнаружения яиц гельминтов увеличивается при применении метода толстого мазка.
Метод «толстого мазка с целлофаном» (по Като) применяется для диагностики аскаридоза, трихоцефалеза, анкилостомидоза (для последнего он особенно ценен). Яйца гельминтов обнаруживают в толстом мазке фекалий, осветленных глицерином и подкрашенных малахитовой зеленью. Для этого используют 3 %-ный водный раствор малахитовой зелени, глицерин, 6 %-ный водный раствор фенола.
Из этих компонентов готовят смесь Като: 6 мл раствора малахитовой зелени, 500 мл глицерина и 500 мл раствора фенола смешивают и хранят в закрытой посуде при комнатной температуре. Раствор стабилен, его используют при приготовлении пластинок по Като. Для приготовления их из целлофана нарезают прямоугольные пластинки размером 20 × 40 мм и погружают их в смесь Като на 24 ч, после чего они готовы к употреблению. Хранят готовые пластинки в смеси Като, в хорошо закрытой посуде при комнатной температуре.
Кусочек фекалий величиной с горошину наносят на предметное стекло, покрывают пластинкой по Като и придавливают резиновой пробкой так, чтобы фекалии размазались по стеклу в пределах пластинки. Мазок оставляют при комнатной температуре для осветления на 30–40 мин. Затем рассматривают под микроскопом.
Достоинствами метода являются его простота, гигиеничность, возможность просмотреть большое количество фекалий, что повышает вероятность выявления яиц. Описанным методом можно выявить яйца нематод и цестод.
Фасциола (Fasciola hepatica). Яйцо правильной овальной удлиненной формы. Оболочка гладкая, тонкая, желтого цвета с крышечкой на одном полюсе и плоским бугорком на другом. Оно заполнено множеством желточных клеток. Размеры 130 × 145 × 70–90 мкм.
Ниже представлена сравнительная характеристика гельминтов (табл. 41, 42, 43).
Описторхис (Opisthorchis felineus). Яйцо овальное, вытянутой формы, слегка асимметрично. Оболочка гладкая, тонкая, светло-желтого цвета. На одном полюсе имеется слабо различимая крышечка, на противоположном – бугорок. Внутри яйца содержится развитая личинка (микроцидий). Размеры 26–32 × 11–14 мкм.
Лентец широкий (Dyphyllobothrium latum). Яйцо овальное желтоватого цвета. Оболочка гладкая, прозрачная, толстая. На верхнем полюсе хорошо просматривается крышечка, на противоположном – бугорок. Внутри яйца многочисленные желточные клетки. Размер 68–71 × 45 мкм.
Вооруженный цепень (Taenia solium) и невооруженный цепень (Taeniarhynchus saginatus). Яйца округлые или слегка овальные с толстой коричневой радиально исчерченной оболочкой. Внутри яйца видна онкосфера (зародыш) с тремя парами крючьев. Яйца обоих видов неразличимы. Размер 31 × 40 мкм.