4. Индуративная стадия. В этот период лимфатические узлы на ощупь очень плотные, иногда «хрящевой» консистенции, безболезненны. Прокол лимфатического узла производится с некоторым затруднением. Пунктат очень скудный. Характерными признаками этой стадии являются наличие небольшого количества нейтрофилов и зрелых лимфоцитов, среди которых обнаруживаются элементы рубцовой ткани (фиброциты и фибробласты), отсутствие макрофагальной реакции и наличие больших участков казеозного некроза. Заключение о туберкулезном характере процесса следует давать лишь при наличии в препарате эпителиоидных или гигантских клеток Пирогова—Лангханса.
5. Фиброзная стадия. Эпителиоидные бугорки в процессе обратного развития. Эпителиоидные клетки вытягиваются и превращаются в волокнистую субстанцию. Ядра также резко удлиняются.
При цитологическом исследовании пунктата находят большое количество лимфоцитов, скопление эпителиоидных клеток, а иногда гигантские клетки Пирогова—Лангханса. Могут обнаруживаться ретикулярные клетки. При нагноении в пунктате находят нейтрофилы в различных стадиях распада. Характер клеточных элементов при туляремии может быть сходным с таковым при туберкулезном или остром лимфадените, поэтому одно цитологическое исследование при данном заболевании решающего значения иметь не может.
Макроскопически пунктат желтовато-зеленого цвета. Нередко в нем содержатся белесоватые крупинки, состоящие из друз лучистого гриба. Для микроскопического исследования необходимо выбрать эти крупинки и приготовить нативный препарат. При подозрении на наличие друз и мицелия лучистого гриба этот препарат нужно окрасить по Граму. Клеточный состав пунктата лимфатического узла при актиномикозе не имеет специфических признаков. Могут встречаться элементы воспалительной реакции, иногда с наличием ксантомных клеток.
Пункция лимфатического узла производится для поисков чумных палочек. Клеточный состав пунктата не имеет характерных признаков.
Пункция лимфатического узла производится главным образом для поиска лепрозных палочек. В пунктате находят вакуолизированные («пенистые») лепрозные клетки, которые являются производными ретикулярных клеток. Диаметр этих клеток колеблется от 30 до 50 мкм. Цитоплазма значительной величины и у многих клеток почти вся занята вакуолями различной величины, тесно примыкающими друг к другу. Вакуоли содержат липоиды, а поэтому при обычной окраске выглядят как пустоты.
Кроме этих клеток, в пунктате находят гигантские клетки с центрально расположенными ядрами и обрывками вакуолизированной цитоплазмы, напоминающие лепрозные клетки. Встречаются различной степени зрелости плазматические клетки, лимфоциты, гигантские клетки инородных тел, а также клетки, схожие с эпителиоидными.
В пунктате наблюдается увеличенное количество плазматических клеток различной степени зрелости и много макрофагов. Количество лимфоцитов уменьшено. Подобные изменения могут встречаться и при других заболеваниях. При достаточном количестве пунктата можно при соответствующей обработке произвести исследование на волчаночные клетки.
Лимфатические узлы при сифилисе могут быть поражены во всех периодах болезни. Однако чаще всего они увеличены в первой и второй стадиях. В большинстве случаев поражаются лимфатические узлы в паховых областях. Поражение лимфатических узлов носит множественный характер. Они довольно плотной консистенции, подвижны и безболезненны, чаще имеют овальную форму и небольшой размер. Пункция лимфатических узлов при сифилисе имеет большое диагностическое значение в начале заболевания, когда серологические реакции могут еще не быть положительными. В этот период болезни в пунктате лимфатических узлов в 80% случаев обнаруживают спирохеты. При цитологическом исследовании пунктата находят большое количество пролимфоцитов. Много клеток находится в состоянии митоза. В некоторых случаях обнаруживают плазматические клетки и макрофаги. Могут встречаться и эпителиоидные клетки. Диагноз можно поставить с уверенностью только при наличии спирохет.
Наиболее типичное расположение увеличенных лимфатических узлов – по заднему краю грудино-ключично-сосцевидной мышцы, но вместе с тем увеличиваются и другие узлы. Их размеры колеблются от величины фасоли до величины лесного ореха. В первые дни болезни они небольшие, затем быстро увеличиваются, достигая к 4–6-му дню наибольших размеров. Лимфатические узлы плотны, подвижны, не спаяны между собой и болезненны.
Клеточный состав пунктата пестрый. Характерной особенностью его является наличие значительного количества разнообразных ретикулярных клеток, среди которых различают атипичные одноядерные клетки часто неправильной формы. В пунктате имеются клетки, схожие с плазмоцитами, плазмобластами, пролимфоцитами и лимфобластами. Кроме перечисленных клеток, в пунктате лимфатического узла обнаруживают большое количество пролимфоцитов и немного зрелых лимфоцитов.
Глава 15Современные методы лабораторной диагностики
Виды лабораторных исследований
Иммуноферментный анализ входит в группу иммунохимических методов и относится к наиболее популярным методам лабораторной диагностики, применяется при определении инфекционных, воспалительных, эндокринных, онкологических, аллергических и иммунных заболеваний, задействуется в определении уровня онкомаркеров, гормонов, выявлении лекарственных препаратов и прочих соединений в биологических средах человека.
Принцип действия ИФА основан на специфическом взаимодействии между антигеном и антителом. Постановка реакций осуществляется с целью выявления антител или антигенов. Результаты выдаются качественно или количественно. При качественной диагностике выявляется наличие или отсутствие определенных антител или антигенов в биоматериале. При количественной диагностике возможно определить концентрацию вещества в биологической жидкости. Метод ИФА характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью, возможностью определить заболевание и отследить динамику процесса, доступностью.
Сфера применения иммуноферментного анализа:
1) выявление специфических антител к инфекционным заболеваниям;
2) выявление антигенов инфекционных и венерологических заболеваний;
3) исследование гормонального статуса;
4) обследование на онкомаркеры;
5) обследование по поводу наличия аутоиммунных заболеваний.
Ультразвуковое исследование действует на основе отражения ультразвуковых волн от внутренних органов. Данное исследование позволяет создать изображение внутренних органов на мониторе. Различные по плотности среды (жидкость, газ, кость) различным образом отображаются на экране. Посредством узи возможно определить размер и форму внутренних органов и заметить структурные изменения. Эхокардиография (ЭхоКГ) представляет собой вариант УЗИ, применяемый для исследования сердца.
Эндоскопическое исследование представляет собой исследование полостей и полых органов с помощью эндоскопа – гибкого волоконно-оптического инструмента с диаметром трубки 0,8–1,5 см и длиной 0,3–1,5 м. С помощью эндоскопа можно получить качественное изображение бронхов, пищеварительного тракта и др. Современные эндоскопы могут быть оборудованы устройством забора образцов тканей для дальнейших лабораторных исследований, а также электрическим зондом для разрушения патологической ткани.
Компьютерная томография относится к рентгенологическим методам исследования. Характеризуется высокой точностью и разрешающей способностью. При проведении данного исследования делается серия рентгеновских снимков по требуемым параметрам (плоскость, толщина среза и др.).
Магнитно-резонансная томография представляет собой метод исследования, основанный на принципе действия мощного магнитного поля для получения точных изображений органов. Данный метод диагностики относится к высокоточным, но сложным и достаточно дорогим.
Радионуклеидное исследование основано на принципе распознавания радиоактивно меченых веществ, специфичных для того или иного органа. Индикатор (меченые вещества) в небольшом количестве вводят в вену пациента. Особенно популярен данный метод при исследовании кровоснабжения органов, в частности, злокачественных опухолей. Излучение индикаторов, распределившихся по организму, регистрируется гамма-камерой. Изображение воспроизводится на экране и фиксируется. Возможно генерирование трехмерного изображения, в частности, «холодных» или «горячих» узлов в щитовидной железе. Обычно исследование данного вида используется при дифференциальной диагностике.
ПЦР-диагностика представляет собой высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики. Принцип действия основан на выявлении в исследуемой пробе специфического участка ДНК или РНК возбудителя. Благодаря высокой чувствительности данный метод дает возможность выявить даже единичные клетки возбудителей (вирусов, бактерий). Для сравнения, чувствительность микроскопических и иммунологических тестов составляет 103–105 клеток в исследуемой пробе, чувствительность ПРЦ-теста – 10–1000 клеток. Одна биологическая проба дает возможность обнаружения нескольких возбудителей. Еще одно преимущество данного вида диагностики – возможность доклинической и ретроспективной диагностики. Возможно также исследование архивного материала или биологических остатков, что применяется при идентификации личности или установлении отцовства.