1937 г.
Изложенные общие положения учения о вирусных инфекциях служат надежной опорой при изучении отдельных заболеваний. Они позволяют рассматривать каждое вирусное заболевание в освещении, которое проливают на него наши знания относительно других вирусов, и вести исследование знания путем могущественного сравнительного метода.
Когда по распоряжению народного комиссара земледелия было учреждено при Всесоюзном институте экспериментальной ветеринарии отделение по изучению фильтрующихся вирусов, то наш выбор остановился на важнейших инфекциях – чуме свиней, инфекционной анемии лошадей и их энцефаломиелите.
Первые дни болезни сходны тем, что за отсутствием восприимчивых лабораторных животных они не могли быть подвергнуты экспериментальному изучению. А между тем для нахождения надежных способов борьбы с инфекцией необходимо хорошо ознакомиться с ней, лучшим же средством для этого является ее экспериментальное воспроизведение на лабораторных животных. Поэтому нашей первой задачей было воспроизведение чумы свиней и анемии лошадей на мелких животных.
Чума свиней приносит большой ущерб животноводству. Для борьбы с ней повсюду – у нас и за границей – применяется так называемый симультанный метод: заражение вирусом одновременно с введением иммунной вирулицидной сыворотки. Один вирус дал бы тяжелое, даже смертельное заболевание; одна иммунная сыворотка вызывает слишком непродолжительный иммунитет, а оба агента вместе путем легкой болезни сообщают стойкую невосприимчивость. Недостаток этого метода в том, что оба противодействующих средства должны быть дозированы так, чтобы не вызвать ни слишком сильного, опасного для жизни, ни слишком слабого, не оставляющего прочного иммунитета, заболевания. А правильная дозировка для нормальных свиней оказывается неудачной для свиней иного возраста, иной упитанности.
Поэтому теперь переходят к вакцинации так называемыми тканевыми вакцинами, но она пока только в стадии опыта.
По согласному показанию всей литературы ни одно животное, кроме свиней, не восприимчиво к вирусу чумы.
Чтобы вызвать чуму у кроликов, сотрудница нашего отделения Нестерова прибегла к известному способу повышения вирулентности микробов – к прививке в семенные железы. Этот способ, однако, опасен втом отношении, что в семенных железах часто имеется скрытый вирус (так называемый вирус Ш), который может провоцироваться сделанным вспрыскиванием и симулировать положительный результат. Этот вирус Ш не раз подводил исследователей. Он дифференцируется прививкой в мозг, которая при вирусе Ш смертельна. Поэтому Нестерова всегда одновременно вводила вирус чумы в вены и в мозг кролика. Она вызывала таким способом лихорадочное заболевание кроликов, которое передавалось пассажами посредством вытяжки из привитых семенных желез. После 7 пассажей через кроликов Нестерова заразила материалами седьмого 2 свиней, которые заболели и погибли от чумы.
Таким образом, была осуществлена задача, которая до сих пор казалась невозможной – воспроизведение чумы у кроликов. Значение этого достижения видно из того, что в том же, 1936 г. Шюнтон, Мистраль и ДюБрейль вызвали чумным вирусом у морских свинок заболевание, которое, однако, не могло передать чуму свиньям, и тем не менее сочли этот факт настолько значительным, что сообщили о нем Парижской академии наук.
При дальнейших пассажах через кроликов вирус чумы, как это известно в других случаях, привыкая к организму кроликов, утратил вирулентность для свиней. Таким образом, Нестерова находится на пути приготовления кроличьей вакцины для свиней, подобно вакцинам бешенства, желтой лихорадки и др.
В работе с инфекционной анемией лошадей нашей первой задачей было воспроизведение болезни на лабораторных животных. Здесь, однако, в отличие от чумы свиней, утверждается (Опперманн), что очень многие животные – кролики, свиньи, куры, голуби – восприимчивы к этой болезни. Но многочисленные поверочные исследования опровергли эти утверждения и как общий вывод Галловей резюмирует современное состояние вопроса указанием, что до сих пор никому не удалось кроличьим вирусом вызвать анемию у лошадей. Поэтому единственным надежным способом распознавания инфекционной анемии является прививка здоровой лошади крови подозреваемой. Но такой способ применим только для отдельных случаев и не может служить основой для постановки широкой борьбы с этой инфекцией.
И здесь нашей первой задачей было воспроизведение болезни на лабораторных животных.
Нам было известно, что при заражении здоровых лошадей кровью анемичных заболевание наступает скорее, чем при заражении сывороткой крови больных.
Этот факт вполне соответствует нашим знаниям, что вирусы содержатся в форменных элементах крови, тогда как в ее сыворотке находятся противодействующие вирусам бактерицидные антитела.
Ввиду этого мы вели пассажи на кроликах, выбирая тех, которые лихорадили от прививки лошадиного вируса, и получая у них кровь, форменные элементы которой несколько раз промывали для удаления антител. От седьмого подобного пассажа нам удалось заразить жеребенка, вызвав у него повторную лихорадку и падение числа эритроцитов (табл. 3 и 4).
Таким образом, был сделан первый и самый важный шаг в освоении изучаемой инфекции.
Дальнейшая работа была направлена на усиление созданной восприимчивости кроликов к вирусу инфекционной анемии в целях использования кроликов для распознавания этой инфекции.
Пассажи вируса анемии на кроликах
Привит жеребенок № 2.
Заражение жеребенка кроличьим вирусом (температура)
Эта работа была поручена старшему сотруднику отделения К. С. Ермолаевой, которая выполнила ее с большим успехом. Она вводила кроликам в кровь промытые форменные элементы больных анемией лошадей, предварительно блокировав их защитный аппарат 5 – 10 см3 1 % раствора трипановой синьки. Контрольным кроликам она вводила таким же образом кровяные шарики здоровых лошадей.
В заключение мне хотелось бы еще раз подчеркнуть могущество экспериментального метода.
Хотя мои сотрудники и я не располагали усовершенствованной аппаратурой, мы тем не менее, пользуясь экспериментальным методом Дженнера и Пастера, успели добыть новые средства в помощь борьбес инфекциями. Эти средства заключаются в воспроизведении на кроликах чумы свиней и инфекционной анемии лошадей. (Литература: 9 наименований и рисунки не приводятся, – ред.).
Все кролики, привитые кровью анемичных лошадей, дали на 3 – 5-й день лихорадочное повышение температуры, привитые же здоровой кровью не лихорадили.
Кроме того, зараженные кролики нередко имели повторные приступы лихорадки и в некоторых случаях давали снижение числа эритроцитов до 1 000 000 и ниже.
Способ Ермолаевой проверяется теперь в других лабораториях и совершенствуется в нашем отделении. Он разрешит, быть может, задачу диагностики анемии.
Воспроизведя инфекционную анемию на кроликах, мы приступили к важнейшим задачам- вакцинации и сывороточного лечения, которые осуществили при помощи пассажных кроликов.
По отношению к энцефалиту лошадей (менингоподобное заболевание – МПЗ), где имеется полная возможность экспериментирования на лабораторных животных, наше внимание было обращено на нахождение путей к лечению инфекции. Так как клиническое заболевание протекает при нормальной или даже при пониженной температуре, то мы предложили работавшему у нас диссертанту Хилкову испытать на зараженных вирусом энцефалита кроликах лечебное действие лихорадки. Известно, что лечение гипертермией дает благоприятные результаты при сифилисе мозга и некоторых других инфекциях. Действительно, повышая температуру кроликов динитробензолом или убитыми культурами чудесной бактерии В. predigiosum Хилков получил значительный процент выживания зараженных в мозг кроликов. Он затем перешел к лечению лошадей, но покц имел возможность применить этот способ только в 3 случаях, из которых в 2 получил выздоровление. Мне кажется, что в этом направлении можно будет достигнуть благоприятных результатов, особенна если применить вместо общей местную гипертермию.
Некоторые данные о фильтрующихся вирусах проблемы борьбы с чумой свиней
1929 г.
Пятьдесят лет тому назад благодаря открытиям Пастера и усовершенствованиям Коха в бактериологической технике были открыты и установлены один за другим этиологические факторы многих заразных заболеваний. Можно было думать, что этиологию заразных болезней удастся исчерпать изучением бактерий. Однако некоторые инфекционные заболевания и среди них в первую очередь оспа и бешенство, стоявшие в центре медицинского интереса, неизменно давали отрицательные результаты при всех попытках найти возбуждающих их бактерий.
Это обстоятельство навело на мысль, которая и была высказана Пастером, что должны существовать невидимые бактерии. И действительно, изучая кровь чумных животных, я впрыснул теленку в 1886 г. по совету Пастера фильтрат крови и получил заражение чумой. Продолжать эту работу в Одессе не было возможности. Только через 6 лет, в 1892 г., Ивановский в Варшаве установил, что заразная болезнь табачных листьев, известная под названием «мозаика», передается здоровым растениям фильтрованным соком больных. Однако и этот факт не представлял большого интереса до тех пор, пока еще через 6 лет Бейеринк не подтвердил открытия Леффлера и Форша, которые нашли, что отфильтрованная жидкость содержимого пузырьков ящура может вызывать у здоровых животных заболевание ящуром. Вслед за этим были открыты такие же проходящие через фильтры возбудители и при многих других болезнях: перипневмонии, бешенстве, оспе и т. д. С течением времени число их сильно возросло. Эти возбудители, которые характеризовались только отрицательными признаками, а именно тем, что они не задерживаются фильтрами, что они невидимы под микроскопом и что они не растут на обычных для микроорганизмов питательных средах, были названы фильтрующимися вирусами, или просто вирусами.