. В дальнейшем (1946) автор описывает вегетативные гибриды томатов с изменённой окраской плодов и характер наследования её вплоть до четвёртого семенного поколения" (конец цитаты). Как видим, в тщательно проведенных экспериментах Глущенко на пасленовых признаки вегетативной гибридизации были очевидны.
В своей брошюре Глущенко ссылается на довольно многочисленные зарубежные работы (в том числе японские, французские и т. п.), где вегетативная гибридизация подтверждается. По словам профессора Мацуура, сказанным самому Глущенко, Мичуринским движением в Японии охвачено, свыше ста тысяч опытников. Издается обширная мичуринская литература: «Избранные труды» Мичурина {в двух томах); «Избранные труды» Лысенко (в двух томах); «Две генетики» Токуда Митоси (в двух томах); «Руководство по яровизации» Кикучи; «Гнездовые посадки (теория и практика)» Камеи; «Стадии развития и ветвления пшеницы» Иосика и Такасима; «Записки о поднятии урожайности на основе мичуринских методов»; сборник статей «О советской биологии» под редакцией и с предисловием профессора Усами; комплекты еженедельной газеты «Мичуринское сельское хозяйство» и т. д. (31).
Как видим, мичуринское направление генетики подтверждалось многочисленными практическими работами по выведению новых сортов растений. Эти свидетельства приведены в выступлениях учёных на сессии ВАСХНИЛ 1948 г. Мичуринцы демонстрировали достижения селекции и успехи применения метода вегетативной гибридизации. Мичуринцы хорошо знали микроскопическое строение клеток растений. Об этом сказала профессор из Киева. Она знала, что плазмодесмы слишком малы для того, чтобы по ним проходили хромосомы. Кроме того, число хромосом при вегетативной гибридизации не увеличивалось.
Наследование признаков при вегетативном наследовании факт, который установили даже противники вегетативной гибридизации типа Винклера. Этому факту должны были быть найдены объяснения. Лысенко, по крайней мере, пытался это сделать. Формальные же генетики просто отрицали эксперименты. Объяснения критиков вегетативной гибридизации не адекватны. Особенно, когда дело касается сортов, где есть накапливаемые в результате искусственного отбора фенотипические признаки. Другой вопрос, что никто не мог объяснить молекулярные механизмы изменений фенотипа, которые наблюдались как у подвоя, так и у привоя.
Странно, но, по сути, так никто не повторил работы Лысенко, Глущенко и других советских авторов, которые были выполнены очень тщательно. Советские исследователи убедительно доказали, что при вегетативной гибридизации приобретенные свойства передаются по наследству в ряду поколений, хотя большей частью и не половым путем. Почему же тогда без всякого сомнения все эти интереснейшие результаты были отвергнуты формальными генетиками? Видимо, вплоть до недавнего времени генетики просто не знали, как объяснить эксперименты Мичурина и Лысенко с вегетативной гибридизации, то есть при пересадке привоя на подвой. Самое интересное, что даже сейчас многие практические приемы, которые использовал Мичурин, не имеют удовлетворительного теоретического объяснения. И только самые последние наблюдения показали, что Лысенко прав и такие механизмы существуют. Ниже я очень кратко на них остановлюсь.
8.4. ОСОБЕННОСТИ РАСТЕНИЙ
Чтобы понять, как происходит перенос генетического материала при вегетативной гибридизации у растений надо пару слов об особенностях строения клеток и особенностях наследования в растениях. Механизм реализации и хранения наследственной информации в растениях имеет свои особенности. Например, растения легче переносят изменения числа хромосом (231). Клетки растений не двигаются. В растениях все клетки, без исключения, соединены между собой цитоплазматическими мостиками, плазмодесмами, которые пропускают не только обычные химические вещества, но и многие биополимеры, в частности некоторые белки и РНК. По ним (или, как говорят, по флоэме) может осуществляться передача наследственной информации.
В отличие от животных, одна единственная соматическая (не половая) клетка может дать начало целому растению без использования воздействия на транскрипционные факторы. Это означает, что в растениях нет жесткой инактивации генов.
Протопласты формируются после деполимеризации полимеров, образующих клеточную стенку растений. Протопласты способны сливаться друг с другом. Клетки растений могут сливаться, несмотря на клеточную стенку, которая окружает плазматическую мембрану. Это показывает процесс оплодотворения. Клетки, полученные после такого слияния, называются гетерокарионы. Сливаться могут как протопласты одного вида растений, так и протопласты разных видов растений. В растениях одна единственная зрелая клетка может дать начало целому растению.
8.5. СУТЬ ВЕГЕТАТИВНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ
Прививочный (вегетативный) гибрид — это растение, полученное в результате прививки (трансплантации) чужеродной соматической ткани (привой) на материнское растений (подвой); примером стабильного межродового (Sorbus и Aronia) Примером может служить красно-черная рябина (11).
Так что же происходит при вегетативной гибридизации? При пересадке привоя черенок другого растения-гостя внедряется в разрез на коре подвоя или растения хозяина. При разрезе или повреждении коры дерева или, в случае травянистого растения, наружной часто стебля под ней немедленно начинается активное деление и размножение окружающих клеток, которые формируют под корой каллюс или скопление клеток. Каллюс (от лат. callus — толстая кожа, мозоль) — это ткань, образующаяся у растений на поверхности поранения (трещинах, надрезах, в основании черенков, в местах срастания подвоя и привоя при прививках) и способствующая заживлению ран. Состоит из тонкостенных недифференцированных (незрелых) паренхимных клеток, может возникать при делении клеток любой живой ткани растения.
Одновременно делятся и клетки в месте отреза привоя на границе между омертвевшей древесиной и корой. Делящиеся клетки хозяина и гостя устанавливают контакты между собой и формируется общая клеточная система, включающая клетки двух разных растений. Поскольку подвой нормально развивается после пересадки, то логично думать, что он связан с водопроводящей системой хозяина и с системой, транспортирующей питательные вещества из листьев. Следовательно, в этом скоплении вновь образованные клетки устанавливают между собой цитоплазматические мостики, трубочки, или плазмодесмы. Из сельскохозяйственной практики известны случаи, когда после пересадки привоя, все ветки подвоя (то есть хозяина) отрезались и получалось растение, состоящее из корня и ствола хозяина и веток и листьев привоя.
Итак, существует механизм, который мог бы вести к образованию плазмодесмат между подвоем и привоем и образованию общего клеточного синцития (это когда все клетки соединены между собой).
8.6. ПЛАЗМОДЕСМАТЫ
Оказывается участники сессии в то время уже предлагали механизмы передачи наследственной информации через пласмодесматы. Впервые описал плазмодесматы между клетками эндоспермы Тэнгл в 1880 году (326). Как вообще они увидели пласмодесматы, видимо в электронный микроскоп. Их размеры (ширина 30–40 нм) лежат за пределами разрешения светового микроскопа (200 нм). То есть, мичуринцы хорошо знали литературу.
Плазмодесматы представляют собой тонкие трубочки, образованные плазматической мембраной. При этом мембране трубочек непосредственно переходит в плазматические мембраны двух контактирующих клеток. Внутри плазмодесмат имеется ещё более тонкая трубочка образованная мембранами эндоплазматической сети. При этом мембраны сети из одной клетки переходят в мембраны сети другой клетки. Тем самым между клетками образуется два вида каналов: 1) между просветами эндоплазматической сети двух разных клеток и 2) между цитоплазмами двух клеток. Последний канал окружает в плазмодесмате трубочку эндоплазматической сети.
Эксперименты с декстранами, меченными флуоресцентными маркерами, показали, что плазмодесмата проницаемы для частиц с молекулярным весом менее 1 кДа. Плазмодесматы являются чрезвычайно динамичными структурами. Они могут открываться и закрываться. Имеются специальные белки, которые прикрепляясь к стенке плазмодесмат, увеличивают их диаметр (237). После такого воздействия становится возможной проход микрочастиц, содержащих РНК, с общим молекулярным весом до 20 кДа (324).
Многие эмпирические феномены, описанные Лысенко и Мичуриным, долгое время не могли быть объяснены формальной генетикой. Предвосхищая открытия клеточных биологов, Лысенко считал, что из подвоя в привой переходят не хромосомы, а как он называл, ассимиляты. Между тем в 1948 г. уже были известны плазмодесматы.
Вполне возможно, что передача наследственности происходила путем диффузии мРНК через плазмодесматы. Накоплено большое количество данных о том, что plasmodesmata широко используются для транспорта РНК и регуляторных белков. В научной литературе появилось несколько отличных обзоров, посвященных транспорту макромолекул через плазмодесматы. Оказалось, что зеленый флюоресцентный белок (массой 27 кДа) может проходить через плазмодесматы, а белок, составленный из двух молекул подобных флюоресцентных белков, не проходит. Молекулы РНК, состоящие из двойных цепей, легко диффундируют через плазмодесматы. Точно также легко транспортируются через плазмодесматы матричные РНК (266).
Видимо, перенос молекул ДНК по плазмодесматам довольно сложен, а вот перенос матричной РНК или коротких участков состоящих из двойной спирали РНК вполне возможен. В учебнике клеточной биологии Альбертса есть картинка, показывающая, как матричная (информационная) РНК транспортируется по плазмодесмате.
Не всегда образование плазмодесмат возможно. В литературе известны растения паразиты, которые сами могут внедряться в организм другого растения и при этом не подвергаться генетическому воздействию со стороны генома хозяина. Эти паразиты защищены от поставки генетического материала через плазмодесмы. У них выросты клеток, контактирующих с клетками хозяина глубоко внедряются в цитоплазмы соседствующих клеток хозяина. Плазматические мембраны клеток очень плотно внедрены одна в другую, что позволяет качать “соки” из одной клетки в другую без участия плазмодесмат. Такие обширные мембранные контакты в какой-то мере заменяют функцию плазмодесм и одновременно препятствуют перемещению генетического материала из клеток хозяина в клетки паразита и наоборот.