извлекаем мозг, гомогенизируем и отделяем жидкую фракцию. Вируса здесь много больше, чем в предыдущем препарате, да и иммуногенные свойства лучше. А хуже такой препарат тем, что чужеродного белка в нем больше, и, соответственно, он будет реактогеннее при вакцинации. Но, когда надо защитить человека, не до изысков. Мне, например, ставили сделанную по такому методу вакцину от бешенства. Она аж белая была. По десять кубиков в живот через день. Всего 37 инъекций. Жив. Пока. Сижу вот. Рассказываю.
– Так сколько же ты всяких вакцинаций получил?
– Тебе виднее. Личное дело мое подними. Сам, наверное, уже и не вспомню. Склероз у меня, просто Альцгеймер какой-то.
– Ну ладно, пококетничал, и давай быстренько повспоминаем. А личное дело я штудирую, не сомневайся.
– Тогда значит так. Противочумная система по полной программе: чума, холера, сибирская язва, туляремия. Там все четко и ясно. Крепкие, отработанные вакцины. Туляремийную вообще не пробить. Были такие микробиологи, Гайский и Эльберт. Они разработали вакцину от туляремии. Очень заразная бактерия. И очень летучая. Так они сделали такую вакцину – никакой дозой не пробить. Испытали на себе. Мне один ветеран-чумолог поведал историю, как он однажды в заразке (так они инфекционный виварий называют) ртом пипетировал. Было такое в древние времена. Химики и биологи, чтобы некое количество жидкости отмерить, брали в рот верхний конец мерной пипетки и втягивали некоторое количество жидкости. Заражения не происходило, потому что конец пипетки затыкали ваткой туго и стерилизовали. У ассистента кролик подопытный вырвался и начал по заразке носиться. Ветеран мой отвлекся на происшествие и всосал ватку из пробирки вместе с толикой миллиардовой суспензии туляремии в рот. Проплевался, рот спиртом прополоскал – и ничего, только антитела к туляремии подросли. Такая крепкая вакцина.
Против холеры холерогин-анатоксин ставили. Тяжеловатая, правда: я тогда первый раз почувствовал, где у меня печень. А вот потом пошли всякие чудеса полуэкспериментальные. От сыпного тифа то живая, то химическая. Потом от венесуэльского энцефаломиелита лошадей. Там у меня какие-то иммунологические чудеса были. Сначала поставили, как всем, самую продвинутую, двухсоттридцатую. Но антител к возбудителю не появилось. Вернее, появились, но недостаточно по уровню. Не дотянул до контрольных цифр. Тогда поставили американскую, ТС-93 – тоже нет антител. Потом меня угостили экспериментальной, пятнадцатой, – и опять никакой реакции. Номера – это не просто названия вакцин. Вакцины эти живые[30]. Какой номер – столько раз этот вирус пропассировали на культуре клеток, чтобы она потеряла вирулентность. Пассирование – это не на кухне, а когда вирусом заражают, например, животных или культуру клеток. Потом, когда появляется генерация вируса, его собирают и заражают следующее животное (или культуру клеток) и так далее, раз за разом, или, как говорят, пассаж за пассажем.
Постановили, что я толерантен, и оставили в покое, но тут начались работы с Марбургом. Здесь была экспериментальная инактивированная вакцина собственного производства. Ею меня раз семь осчастливили. Потом один из нас подготовил справку по экспериментам, в которой показал, что эта вакцинация не на пользу, а может даже усугубить течение болезни, и ее отменили. Есть такой феномен – антителозависимое усиление инфекции. Это когда с антителами еще хуже, чем без них. Что еще? Осповакцина, конечно. Да ну его, все вспоминать, – в моем медицинском деле почитаешь. Уже, наверное, давно затребовал. Так вот, вернемся к вакцине против Эболы. Мозговая тоже ничего не дала, никакой защиты. Сделали еще попытку с высокоочищенным и концентрированным вирусом. Тут уж уверенность была полная, потому что я таким препаратом иммунизировал кроликов и получал мощнейший иммунный ответ. Но нет. Оказалось, антител много, а нейтрализующих вирус нет. Знаешь, иногда цель эксперимента как пещера-обманка. Был в моей жизни такой случай. Мы на Байкале пошли в Кадильную падь, зная, что там много пещер. Пошли одни новички и, где эти пещеры, толком не знали. Нашли парочку небольших и неинтересных пещер, а где искать дальше – непонятно. До пади шли по горной тропе 19 километров. Устали и ждали, что пещеры вознаградят нас эмоционально, а найти ничего не можем, да и искать вроде бы уже негде. Бредем, уставшие и разочарованные, непонятно куда. И вдруг высоко на горе видим: вот она, красавица. Прямоугольный четкий вход, за ним – таинственная, манящая темнота. Прямо как нарисованная, даже не верится, вдруг обман зрения. Усталость как рукой сняло, и мы вверх по осыпям, скальнику. Все ближе, ближе. Видим: точно, не тень никакая. Вход в скалу, прямоугольной формы. Хоть и высоко, но на такую и силы не жаль тратить. Вот она, наконец совсем рядом. Все в поту буквально врываемся в нее. Массивный, просто грандиозный, как портал тоннеля, проем, прохладная темнота за ним и… о боже! Не успели приготовить факелы, как начавшие привыкать к темноте глаза увидели наклонную плиту, венчавшую коридор длиной всего метра три. На плите кто-то из предшественников участливо написал: «С легким паром!» и положил носовой платочек. Дескать, утрите пот, коллеги. Все, точка, финиш. Все силы и время растрачены, и продолжения нет. Вот с инактивированной вакциной против Эболы была как раз такая история.
– Вот тут давай поподробнее и без лирических отступлений. Вы сделали инактивированный препарат, увидели, что он неэффективен, и все-таки продолжали в этом направлении. Зачем?
– Видишь ли, в культуральной жидкости, в которой культивируются инфицированные клетки и куда выходит вирус, этого самого вируса как белка физически значительно меньше, чем других белков: продуктов жизнедеятельности самих клеток, компонентов культуральной жидкости и прочего. При концентрировании и очистке все посторонние белки удаляют, а нужных вирусных белков в таком препарате будет процентов 90–95. Как на обогатительной фабрике, пустую породу отсеивают, увеличивая процент ценной. Значит, иммунный ответ на введение такого препарата будет сильнее, а реактогенность меньше. Но концентрирование филовирусов, к которым относится Эбола, – это особая песня. Началось все с вируса Марбург. У нас была группа, долго и безуспешно бившаяся над тем, чтобы получить большие количества очищенного вируса Марбург.
– Зачем?
– Для разных целей. Начать хотя бы с того, что технологии полимеразной цепной реакции, позволяющей из одной копии нуклеиновой кислоты настругать тысячи подобных, тогда еще не было. И для того чтобы просто прочитать геном этого вируса, нужно было получить много, очень много вируса в очень малом объеме. Хотя бы сто миллиардов в одном миллилитре. Но если на культуре клеток он дает урожай десять тысяч вирионов в миллилитре, надо вырастить сто столитровых ферментеров или сто тысяч литровых матрасов и потом все это сконцентрировать до объема миллилитра. Мучились долго, повышали урожайность, гоняли ферментеры, научились концентрировать фильтрацией в сотни раз. А потом один толковый парень взял и нашел простой и дешевый путь. Так получили препаратив Марбурга.
– Что значит препаратив?
– Это сленг. Значит препаративные количества. Миллиграмм. Десять миллиграмм. То есть столько, что уже можно провести некие исследования, работу. После такой долгой истории браться за получение препарата Эболы никто не хотел. Мне деваться некуда – я был обязан сделать диагностикум, а для этого нужен очищенный антиген, и сделал это довольно быстро. Получил крутой – ложка стоит – препарат. Миллиграмм для начала. Это примерно 10 в степени 12 или 13. В общем, триллионы. Точно подсчитать сложно. Немного подразвел и иммунизировал им животных, получил мощную иммунную сыворотку. А ведь в это время считалось, что антитела на Эболу вообще не образуются – в статьях классиков написано было. Я пробую инактивировать вирус и иммунизировать – получаю прекрасный иммуный ответ у кроликов. Думаю: «Вот она, вакцина». Вперед, дни и ночи. Энтузиазм такой, что и ночевали на работе, вернее досыпали, поскольку бо́льшую часть времени работали. Уверенность в препарате – хоть себе вводи вакцину и разрешай. «Разрешить» – это опять вирусологический сленг, значит заразить, точнее, проверить заражением эффективность какого-нибудь лекарства или вакцины. Вот наконец препарат готов, проверен, обезьяны и морские свинки получены. Мы их заиммунизировали, то есть провакцинировали и через месяц заразили разными дозами (чтобы оценить, какую инфицирующую дозу держит такая вакцина: десять летальных доз, сто, тысячу, десять тысяч). А она ничего не держит. Вот тебе и «с легким паром».
То есть не то чтобы совсем ничего: морские свинки (менее чувствительные к этой заразе, чем обезьяны) примерно пятьдесят летальных доз держали, но обезьяны погибали уже при десяти. Можно, конечно, и из этого результата что-то сделать. Оптимизировать, добавить антигена, адъювант[31] применить или двукратную вакцинацию. Вытянуть его на два с половиной – три логарифма защиты для свинок. Но такая вакцина – как та же пещера. При входе вроде и пещера, а на самом деле непонятно что. Я рассчитывал создать препарат, который защищал бы даже обезьян не менее чем от тысячи летальных доз, и затею с убитой вакциной бросил. Потом коллеги из военного вирусологического центра так и сделали. Взяли в десять раз больше антигена, адъювант и двукратную вакцинацию и получили выживаемость большинства обезьян. Но разрешали они всего десятью летальными дозами, да и адъювант, использованный ими, к человеку неприменим. В общем, дальше публикации дело не пошло. Я к этому времени показал, что при инактивации вируса Эбола денатурирует белок, на который вырабатываются антитела, вызывающие появление нейтрализующих антител. Понимаешь, что получается? Иммунизируешь таким убитым вирусом. Антител образуется море, а нейтрализующих нет. И все. Защиты нет и не будет никогда. С легким паром. Вы зря сюда карабкались.